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Q:什么是靶向治療?
靶向治療是在細(xì)胞分子水平上,針對已經(jīng)明確的致癌位點的治療方式(該位點可以是腫瘤細(xì)胞內(nèi)部的一個蛋白分子,也可以是一個基因片段)??稍O(shè)計相應(yīng)的治療藥物,藥物進(jìn)入體內(nèi)會特異地選擇致癌位點來相結(jié)合發(fā)生作用,使腫瘤細(xì)胞特異性死亡,而不會波及腫瘤周圍的正常組織細(xì)胞,所以分子靶向治療又被稱為"生物導(dǎo)彈"。
不同分類的分子靶向藥物針對的是不同的基因靶點,通過驅(qū)動基因檢測,可以發(fā)現(xiàn)是否存在相應(yīng)的基因靶點,從而有針對性地為患者選擇合適的靶向藥物。
Q:FISH、實時熒光定量PCR、二代測序、免疫組化的區(qū)別和一般用途?
(1)FISH(fluorescence in situ hybridization)技術(shù)是熒光標(biāo)記的原位雜交技術(shù)。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的,二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。該技術(shù)不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢。
(2)實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)是一種在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中,以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過內(nèi)參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析的方法。廣泛應(yīng)用于腫瘤標(biāo)志物及瘤基因檢測實現(xiàn)腫瘤病診斷;遺傳基因檢測實現(xiàn)遺傳病診斷等各臨床醫(yī)學(xué)相關(guān)的領(lǐng)域。
(3)高通量測序技術(shù)(High-throughput sequencing)又稱“下一代”測序技術(shù)("Next-generation" sequencing technology),以能一次并行對幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定和一般讀長較短等為標(biāo)志。廣泛應(yīng)用于全基因組水平、轉(zhuǎn)錄組水平上進(jìn)行全轉(zhuǎn)錄組測序、進(jìn)行小分子RNA測序等方面。
(4)免疫組化又稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry),是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進(jìn)行定位、定性及相對定量的研究。在常規(guī)腫瘤病理診斷中,5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態(tài)學(xué)診斷。尤其是免疫組化在腫瘤診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認(rèn)可,其在低分化或未分化腫瘤的鑒別診斷時,準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。
博奧的腫瘤單基因檢測產(chǎn)品ALK/ROS1/HER-2/RET/MET/BRAF基因檢測,主要應(yīng)用FISH技術(shù)和實時熒光PCR技術(shù)進(jìn)行檢測,在2018版的CSCO肺癌指南中,推薦NSCLC應(yīng)平行進(jìn)行EGFR/ALK/ROS1基因的檢測,在標(biāo)本量有限的情況下,可采用經(jīng)過驗證的檢測方法同時檢測多個驅(qū)動基因的技術(shù), 如多基因同時檢測的PCR技術(shù)或二代測序技術(shù)(next generation sequencing, NGS) 等。博奧腫瘤的多基因Panel檢測產(chǎn)品主要采用NGS方法,PD-L1、MMR主要采用免疫組化的方法進(jìn)行檢測,為患者提供多組學(xué)、全方位的檢測。
Q:一名左半結(jié)腸癌患者,剛剛完成手術(shù),后期需要進(jìn)行治療,可以推薦使用哪款產(chǎn)品檢測,說明其原因?
可以考慮使用結(jié)直腸癌靶向用藥指導(dǎo)基因檢測(血液14基因)、結(jié)直腸癌靶向用藥指導(dǎo)基因檢測(組織22基因)、標(biāo)準(zhǔn)版腫瘤靶向用藥基因檢測(組織52基因),或使用組織樣本進(jìn)行KRAS/NRAS/BRAF的單基因檢測。
原因是抗EGFR靶向治療的療效與部位之間存在很明顯的關(guān)系。在左半結(jié)腸中,無論是帕尼單抗還是Cet,與單純化療或化療聯(lián)合Bev的治療對比,抗EGFR均能帶來顯著獲益;而在右半結(jié)腸,與單純化療相比,抗EGFR靶向治療的獲益則明顯減少或不能獲益;Bev在右半結(jié)腸的獲益顯著高于抗EGFR靶向治療。故考慮到左半腸患者中使用EGFR單抗,檢測EGFR信號通路基因,使用小Panel即可達(dá)到目標(biāo)且更經(jīng)濟(jì)。
Q:TMB是什么?
TMB是Tumor Mutation Burden(腫瘤突變負(fù)荷),腫瘤細(xì)胞基因組內(nèi)代表蛋白編碼區(qū)的突變分布的密度,以蛋白編碼區(qū)的突變位點總數(shù)除以蛋白編碼區(qū)的總堿基數(shù)目,單位為mutations/MB。?
Q:博奧的腫瘤檢測產(chǎn)品是否有醫(yī)療器械注冊證?
博奧腫瘤產(chǎn)品目前正處于報證階段。目前市場上獲證的產(chǎn)品癌種均為肺癌,報證的基因數(shù)為3-10個,雖然醫(yī)院可以自己開展檢測,但并不能滿足臨床需求,患者的獲益情況有限;博奧的腫瘤產(chǎn)品線,能夠?qū)δ[瘤患者進(jìn)行全程管理,同時博奧資質(zhì)齊全,保證了結(jié)果的準(zhǔn)確性。
Q:全能版腫瘤個體化用藥指導(dǎo)基因檢測(800基因)計算TMB值準(zhǔn)確嗎?
計算TMB的金標(biāo)準(zhǔn)是組織樣本做全外顯子測序。全能版腫瘤個體化用藥指導(dǎo)基因檢測(800基因)中,有601個基因檢測的是全外顯子區(qū)域,是市場上大panel中檢測基因全外顯子數(shù)量最多的。全能版腫瘤個體化用藥指導(dǎo)基因檢測(800基因)TMB值與WES一致率高達(dá)95.2%,bTMB與組織驗證一致性75.5% 。
Q:對于尋求靶向藥物的非小細(xì)胞肺癌患者來說,做個肺癌小panel就足夠了,做大panel是不是沒有意義?
患者接受的基因檢測覆蓋面更廣,就更有可能發(fā)現(xiàn)潛在的治療方法。這種方法在關(guān)鍵時刻能救命,而且例子并不罕見。例如2018年獲批的廣譜靶向抗癌藥拉羅替尼的靶點NTRK基因融合,在肺癌小panel中是不包括這個基因的,組織52基因和800基因均包括NTRK1/2/3融合的檢測。
Q:乳腺癌BRCA1/BRCA2基因突變檢測的臨床意義,及乳腺癌患者報告問題?
預(yù)防指導(dǎo):BRAC1/2基因突變可以為高危人群或健康人群的患病風(fēng)險評估提高參考,通過預(yù)防性措施降低發(fā)病風(fēng)險,同時為突變攜帶人群親屬的患病風(fēng)險提供風(fēng)險評估參考;用藥指導(dǎo),BRAC1/2基因突變的乳腺癌卵巢癌患者對鉑類和PARP抑制劑類藥物(奧拉帕尼)敏感; 預(yù)后評估,BRAC1/2基因突變攜帶者有相對高的同側(cè)乳腺癌復(fù)發(fā)或?qū)y乳腺癌風(fēng)險,同時BRAC1/2基因突變是保乳治療的相對禁忌癥。目前我們報告只出具預(yù)防指導(dǎo)報告,但很快我們上線針對腫瘤患者的用藥指導(dǎo)報告。
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